怎样提高细胞冻存的成功率
在做细胞冻存这种济南实验试剂的时候,有很多的小学弟学妹跟着学长学姐做。学弟学妹按照应有步骤一步步的践行,可是最后还是死了很多很多。这看起来好像是一个笑话,但是实际上这更像是一个很痛苦的事情。因为对于科研人员来说,细胞是最脆弱又十分重要的宝贝,因为它承担着太多太多实验者的希望。细胞冻存复苏的时候,经常会因为一些小细节导致细胞的死亡,例如:
风水
出各种玄学状况的时候,污染物是毋庸置疑的源头,培养室的空气、培养箱内循环的空气、培养箱的层架以及显微镜的载物台和物镜都可能是污染源。还
有就是你自己,进入无菌间后尽量不要说话,进入无菌间后尽量不要说话,进入无菌间后尽量不要说话。打开培养箱后jue对不能说话,打开培养箱后jue对不能说话,打开培养箱后jue对不能说话。
乐发2不要对着它念叨,要用你的心去感化细胞,重要的事情说三遍。
温度
慢冻快融是细胞冻存复苏的核心关键词之一。常见的是 -4℃ → -20℃ 至 - 40℃→ -80℃ → 液氮,有着严格的梯度降温。
目前更多使用程序降温盒,将细胞冻存管放于盒内,之后再置于超低温冰箱,程序降温盒可控制每分钟下降1℃,一定要避免温度原因导致细胞自取灭亡;除非使用了成分经过优化、经过严格测试的冻存液,才能免去程序降温这个繁琐的步骤。保存的时候也要保证整个细胞都是处于液氮的液面下方,避免温度对细胞存活的影响。
水土
解冻后的细胞要用和以前一样的培养液和无血清细胞冻存液种类乐发2。因为每一种细胞都有自己特定的,并且已经熟悉了的生长环境。突然使用不一样的培养液和血清,会造成细胞生长不良,甚至死亡。这和一个人突然离家千里,会水土不服是一样的道理。
除了操作中的各种小细节,还有一个实验雷区,就是配制无血清细胞冻存液质量乐发2。常见的冻存液配制要遵循培养基 + 血清 + DMSO 的成分要求,根据细胞实际判断成分配比,还建议使用程控仪,注意配制温度,一个不小心就又会影响细胞的存活效果。